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培養基保存的注意事項

更新時(shí)間:2024-05-14   點(diǎn)擊次數:45次

一、商品化脫水干燥培養基的保存
 (1)濕度:干粉培養基具有很強的吸濕性,因此必須在保存的干燥的環(huán)境中,特別是已經(jīng)開(kāi)瓶的培養基,需要盡可能在濕度低的環(huán)境中密封保存。如保存過(guò)程中發(fā)現培養基出現吸潮結塊、粘稠變色等現象,則不能使用。
  注:有些培養基因干粉中添加了吐溫80(如MRS培養基)等液體成分,粉末略有粘連或小塊狀,可以輕松壓碎,并非吸潮導致,不影響使用。
 (2)溫度:多數商品化脫水培養基可常溫保存(一般指10-30℃)或陰涼處保存(一般指不超過(guò)20℃),對于含不穩定成分的培養基(如某些抗生素、顯色底物等),可在2-8℃冷藏保存。保存溫度過(guò)高易導致某些不穩定成分變性或降解。
 (3)光照:所有培養基都應避免陽(yáng)光直射,置于暗處保存,含對光敏感成分的培養基應采取必要的遮光措施保存。

  小結:環(huán)境的濕度、溫度和光照是影響培養基保存期限的主要因素,未開(kāi)封的商品化培養基應按照說(shuō)明置于相應的條件下保存,已開(kāi)封的培養基應采取適當的密封措施,或盡可能降低保存環(huán)境的溫度與濕度,更有利于培養基的保存。


二、實(shí)驗室自制培養基的保存
  在實(shí)驗室中,有時(shí)配制的培養基用不完,需要存放下次使用,有時(shí)候需預制大量培養基待用,經(jīng)常會(huì )遇到半成品培養基的保存問(wèn)題。決定半成品或成品培養基效期的主要因素是光澤、穩定和密封性。
 (1)成分簡(jiǎn)單的純營(yíng)養類(lèi)培養基(如只含蛋白胨、氯化鈉、磷酸鹽等成分相對穩定的培養基,營(yíng)養肉湯、LB肉湯、緩沖蛋白胨水等):這些培養基相對穩定,通常室溫可保存數天或數周,若密封避光冷藏保存,通??杀4鏀翟?。
  注:固體培養基用前可水浴加熱或用微波爐溶化,通常只能溶化一次,反復的加熱溶化會(huì )導致?tīng)I養降低和瓊脂變軟。
 (2)需添加不穩定成分的不完整培養基(如添加卵黃的MYP、添加羊血的血瓊脂、添加抗生素的培養基等):可將未添加不穩定成分的基礎培養基在室溫(通??杀4鏀堤欤┗蚶洳孛芊猓ㄍǔ?杀4鏀抵芑驍翟拢┍4?,臨用前再加入不穩定成分制成完整培養基。若已加入不穩定成分,應在2-8℃冷藏保存,盡快使用。
  注:一些液體培養基可以冷凍保存,融化后不影響使用,但含瓊脂的培養基不可以冷凍,結冰會(huì )破壞瓊脂結構;固體的培養基在使用前需加熱溶化后再加入不穩定成分,加入不穩定成分后不可再加熱。

 (3)只能加熱滅菌或過(guò)濾除菌的培養基(如XLD、亞XI酸鹽胱氨酸增菌液等,含不耐熱成分):此類(lèi)培養基相對較不穩定,建議現配現用,或2-8℃冷藏保存數日。


三、商品化即用型培養基
 (1)試管或液體瓶裝培養基、均質(zhì)袋等:商品化的即用型通常采取了有效的滅菌方式和密封保存,未開(kāi)封前按說(shuō)明保存即可;若已開(kāi)封,應做好有效措施防止污染,密閉保存,含不穩定成分的應冷藏保存。
  注:一些含染料或酸堿指示劑的培養基應注意避光保存,如煌綠乳糖膽鹽、RV肉湯、乳糖蛋白胨等培養基,長(cháng)時(shí)間見(jiàn)光易發(fā)生變色。
 (2)瓊脂斜面、平皿等:大多數商品化的瓊脂培養基建議保存在20℃左右的環(huán)境中,含不穩定成分的瓊脂培養基可置于5℃左右的冷庫中保存。

   ① 目前市場(chǎng)上大多數的平皿保存溫度都寫(xiě)室溫或5-25℃的一個(gè)很寬的保存范圍,但在實(shí)際保存過(guò)程中受水份蒸發(fā)和冷凝水的影響,建議保存在20℃左右效果更佳,溫度過(guò)低易出現冷凝水,溫度過(guò)高易導致培養基失水。

   ② 不建議使用冰箱保存。冰箱的溫度相對不恒定,制冷過(guò)程中溫度偏低易起霜,易導致培養基結冰,長(cháng)期在冰箱中保存易導致瓊脂出現冰晶,結構被破壞。若要使用冰箱,建議將培養基放置在遠離制冷或貼壁的位置,冷藏溫度盡量調高一些。

   ③ 拆封后的平皿不易久存,因為在非密閉環(huán)境中平皿易逐漸失水變薄。

 (3)即用型生化管、鑒定條等:一些成分簡(jiǎn)單的生化管(如蛋白胨水、嗜鹽性胰胨水等)可在室溫條件下存放較長(cháng)時(shí)間,含酸堿指示劑的需要避光保存,在冷藏條件下可保存更長(cháng)時(shí)間。

 (4)試劑盒、染色液等:建議按照說(shuō)明書(shū)保存,冷藏條件更穩定。


  總結:低溫、避光、密封和生產(chǎn)工藝是決定即用型培養基有效期長(cháng)短的關(guān)鍵外在因素。對于含不穩定成分的培養基,低溫、避光是延長(cháng)有效期的重要手段;對于含瓊脂的培養基,在冷藏時(shí)需注意不可使培養基結冰。


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