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    乳酸桿菌選擇性培養基原理及實驗現象

    更新時間:2024-06-20   點擊次數:629次

    一、用途:

      用于乳酸菌的分離培養。


    二、實驗原理:

      胰酪蛋白胨、牛酵母浸粉提供氮源、維生素、生長因子;葡萄糖提供碳源;磷酸氫二鉀為緩沖劑;枸櫞酸三銨、硫酸鎂、硫酸錳、硫酸亞鐵、吐溫-80和乙酸鈉為培養各種乳酸菌提供生長因子,吐溫80為乳酸桿菌提供所需的代謝脂肪酸;檸檬酸銨和乙酸鈉能夠抑制一些雜菌的生長,包括鏈球菌、霉菌和除乳酸桿菌外的大多數口腔微生物菌群;加入乙酸,使pH值降低,抑制了其它細菌的生長,有利于乳酸桿菌的分離;加入碳酸鈣是由于乳酸菌在培養基中產酸可以形成溶鈣環,便于區分;瓊脂是培養基的凝固劑。


    三、培養基配方(g/L):

    酵母浸粉

    2.0

    胰酪蛋白胨

    10.0

    磷酸二氫鉀

    2.0

    牛肉浸粉

    10.0

    硫酸鎂

    0.2

    葡萄糖

    20.0

    乙酸鈉

    5.0

    枸櫞酸三銨

    2.0

    硫酸錳

    0.05

    碳酸鈣

    5.0

    吐溫80

    1.0

    瓊脂

    25.0

    pH 6.0-6.5  25℃

    此配方可以進行改良或增加營養成分以獲得最佳的結果

    四、試驗方法:

      1、稱取本品82.25g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝三角瓶,每瓶 200ml,115℃高壓滅菌 15-20min,冷至 50℃左右時,傾入無菌平皿,備用。

      2、制備質控菌液。

      3、用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環,將接種環接觸容器邊緣3次去除多余液體,在平板表面劃三區,同時接種兩個平板。

      4、36±1°C下培養24-48小時,記錄實驗結果。


    五、結果觀察與解釋:

      接種以下質控菌株,在36±1℃下培養24-48小時:

    質控菌株

    菌株編號

    接種量(CFU)

    方法

    質控評定標準

    其他特征

    嗜酸乳桿菌

    CICC6005

    /

    定性

    +++

    白色突起菌落,有溶鈣環

    植物乳桿菌

    ATCC8014

    /

    定性

    +++

    白色突起菌落,有溶鈣環


    圖1 植物乳桿菌微生物質控結果


    六、注意事項:

      本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。



    注:本文屬海博生物原創,未經允許不得轉載。


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