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MRS瓊脂的制備步驟是怎樣的?需要注意哪些關(guān)鍵步驟?

更新時(shí)間:2024-04-21   點(diǎn)擊次數:42次
  MRS瓊脂是一種常用于乳酸菌選擇性培養的固體培養基。以下是MRS瓊脂的制備步驟:
 
  1、準備所需材料:蒸餾水、磁力攪拌器、pH計、高壓滅菌鍋、無(wú)菌操作臺、培養皿等。
 
  2、稱(chēng)量:根據實(shí)驗需要,稱(chēng)取適量的瓊脂粉。通常,每升蒸餾水需要加入135克瓊脂粉。
 
  3、溶解:將稱(chēng)好的加入蒸餾水中,使用磁力攪拌器攪拌均勻,直至溶解。注意不要加熱過(guò)快,以免影響培養基的質(zhì)量。
 
  4、調節pH值:使用pH計測量溶液的pH值,根據推薦pH范圍(通常為5.7±0.2),用稀鹽酸或稀氫氧化鈉溶液調節pH值。調節過(guò)程中要緩慢滴加,避免pH值波動(dòng)過(guò)大。
 
  5、高壓滅菌:將調好pH值的溶液倒入高壓滅菌鍋中,進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。通常,滅菌條件為121℃,15分鐘。滅菌完成后,待壓力降至安全范圍內,方可打開(kāi)鍋蓋。
 
  6、倒平板:在無(wú)菌操作臺上,將滅菌后的溶液倒入無(wú)菌的培養皿中,每個(gè)培養皿約倒入15-20毫升。倒完平板后,輕輕搖晃培養皿,使瓊脂均勻分布。
 
  7、凝固:將倒好的平板放置在室溫下,待瓊脂凝固。凝固時(shí)間通常為15-30分鐘。凝固后的平板可立即使用,也可放入4℃冰箱保存備用。
 
  8、儲存:未使用的平板應儲存在4℃冰箱中,避免長(cháng)時(shí)間暴露在高溫和潮濕環(huán)境中,以免影響其質(zhì)量。
 

MRS瓊脂

 

  在制備MRS瓊脂的過(guò)程中,需要注意以下關(guān)鍵步驟:
 
  1、確保所用材料和器具的無(wú)菌性,避免污染。
 
  2、溶解時(shí),要確保充分攪拌,使其溶解。
 
  3、調節pH值時(shí),要緩慢滴加稀鹽酸或稀氫氧化鈉溶液,避免pH值波動(dòng)過(guò)大。
 
  4、高壓滅菌時(shí)要確保滅菌條件達到要求,以保證培養基的無(wú)菌性。
 
  5、倒平板時(shí)要在無(wú)菌操作臺上進(jìn)行,避免污染。
 
  6、凝固后的平板要及時(shí)使用或儲存在4℃冰箱中,避免長(cháng)時(shí)間暴露在高溫和潮濕環(huán)境中。
 
  總之,在制備MRS瓊脂的過(guò)程中,要嚴格遵循操作規程,確保培養基的質(zhì)量和無(wú)菌性,為乳酸菌的選擇性培養提供良好的基礎。
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