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    甘露醇卵黃培養基基礎原理和使用方法

    更新時間:2024-07-19   點擊次數:407次

     

    一、試驗原理:

      用于分離培養病原性金黃SE葡萄球菌。

      蛋白胨和牛肉粉提供氮源、維生素和生長因子;D—甘露醇為可發酵糖類;7.5%濃度氯化鈉可抑制除葡萄球菌外的大部分微生物的生長;瓊脂是培養基的凝固劑;酚紅為pH指示劑,金黃SE葡萄球菌可分解培養基中的甘露醇產酸,使菌落周圍變黃,并能降解卵黃中的卵磷脂使菌落產生暈圈。

     

    二、培養基配方(g/L):

    蛋白胨

    10.0

    D-甘露醇

    10.0

    牛肉粉

    2.5

    氯化鈉

    75.0

    酚紅

    0.025

    瓊脂

    15.0

    pH 7.4±0.2 25℃

     

    三、試驗方法:

      粉體裝培養基的使用:

      1. 稱取本品112.5g,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中,煮沸1分鐘,121℃高壓滅菌15分鐘,待培養基冷卻至45-50℃時,無菌操作,加入50%卵黃乳液30ml,搖勻,傾入無菌平皿,備用。

      2. 制備質控菌液。

      3. 選擇合適稀釋度的質控菌液0.1ml,均勻涂布于平板上,每一稀釋度接種兩個平板。用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環,將接種環接觸容器邊緣3次去除多余液體,在平板表面劃六條平行直線,同時接種兩個平板。

      4. 36±1℃需氧培養24-48小時,記錄實驗結果。

     

    四、結果觀察與解釋

      接種以下質控菌株,36±1℃需氧培養24-48小時:

    質控菌株菌株編號接種量(CFU)參比或計數培養基方法質控評定標準其他特征大腸埃希氏菌ATCC25922//半定量G≤1/傷寒SHA門氏菌ATCC14028//G≤1/金黃SE葡萄球菌ATCC653820-200TSA定量PR≥0.7黃色菌落,菌落周圍有暈圈金黃SE葡萄球菌ATCC2592320-200PR≥0.7黃色菌落,菌落周圍有暈圈表皮葡萄球菌CMCC(B)2606920-200PR≥0.7紅色菌落,沒有暈圈

     


    圖1-1 甘露醇卵黃培養基微生物質控結果

     

    五、注意事項:

      本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。

     

    注:本文屬海博生物原創,未經允許不得轉載。


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